// 1小核酸药物介绍
小核酸药物在2015年之前只有2款药物上市。1998 年，全球首款 ASO 药物 (反义寡核苷酸药物) Vitravene（Fomivirsem）批准上市；2013年Ionis公司的Mipomeren上市；2015年至今，已经有13个小核酸药物上市，适应症主要包括杜氏肌营养不良、肿瘤、囊性纤维化等各类疾病。
小核酸药物目前主要分为包括反义核酸（ASO）、小干扰RNA（siRNA）、微小RNA（miRNA）、小激活RNA（saRNA）、信使RNA（mRNA）适配体（aptamer）、核酶(ribozyme)、抗体核酸偶联药物（ARC）等，PNA(肽核酸)。
表1 小核酸药物研发公司及在研品种
// 2小核酸药物优势
在靶向小分子药物之后，2000年以后抗体药物为主的生物药逐渐出现，与小分子化学药相比，抗体药物可作用的靶点蛋白种类更多，但是生产成本更高，结构复杂；小核酸类药物基于碱基互补原理对表达相关蛋白质的基因进行调节，结构设计、化学修饰和递送系统的设计与序列的设计是相对独立的；与小分子和抗体药物相比，小核酸药物具有明显的优势。
表2 小核酸药物与其他药物的对比
// 3小核酸药物的固相合成
小核酸药物的固相合成方法与固相合成多肽方法类似，都是采用固相载体，多肽固相合成经过脱保护、洗涤、偶联、乙酰化，经过多个循环得到目标肽，最后将肽从树脂上切割下来；小分子核酸固相合成脱保护、偶联、氧化、加帽循环。具体合成需要的树脂，偶联剂，原料等如下：
3.1寡核苷酸的修饰
一般情况下，未经修饰的反义寡核苷酸被细胞吸收的效率较低，且容易被细胞内普遍存在的核酸酶降解，为了克服这两个缺点、提高成药性，为了提高寡核苷酸药物的递送能力，需要对寡核苷酸的主链、核糖或者核碱基进行修饰，常见的修饰方法如下：
3.2寡核苷酸的纯化
寡核苷酸的纯化常用方法是反相HPLC和离子交换HPLC，两种纯化都要用才能提高寡核苷酸的产品纯度。首先两种分离方法需要考虑的除杂种类是有区别的，反相HPLC考虑的样品中杂质与产品极性的大小，分离度如何；而离子交换HPLC考虑样品中的杂质与产品所带的电荷不同进行分离，所以采用两种纯化方法才能得到高质量的产品。反相HPLC主要分离不同长度的寡核苷酸，对于长度较短的寡核苷酸分离效果有限；核酸药物由于其携带的负电荷特征对分离色谱柱C18填料纳米填料残余硅羟基封端的要求更高。离子交换HPLC对于较长的寡核苷酸分离效果降低，因为较长的寡核苷酸比较短的寡核苷酸电荷区别小，寡核苷酸长度增加，峰会增宽，不利于分离。所以联合两种纯化方法才能得到高纯度的寡核苷酸。
